SESIÓN 10 PRÁCTICA 12: CUANTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS POR TURBIDEZ
OBJETIVO
Identificar en un agua de muestra el número de microorganismos utilizando el método nefelométrico.
FUNDAMENTO
La espectrofotometría de absorción consiste en la medición de la radiación que llega a un detector tras producirse un fenómeno de absorción de luz por parte de una sustancia absorbente.
En química clínica, el material en estudio es generalmente una solución, y las medidas se hacen ordinariamente dentro del espectro comprendido entre los 220 y 800 nm. Es aplicable tanto para análisis cualitativos como cuantitativos.
En química clínica, el material en estudio es generalmente una solución, y las medidas se hacen ordinariamente dentro del espectro comprendido entre los 220 y 800 nm. Es aplicable tanto para análisis cualitativos como cuantitativos.
Es un aparato que se utiliza en laboratorio de
tratamiento de aguas. Mide la densidad óptica, la absorbancia luz transmitida a
través de una suspensión. Se debe realizar una curva estándar para relacionar
los valores de absorbancia con la masa bacteriana en una muestra problema.
La cantidad de luz
dispersada es proporcional al cociente entre el tamaño de la partícula y la
longitud de onda incidente; la sensibilidad de la técnica aumenta a longitudes
de onda (λ)
Se mide el número de
unidades de colonias según las cantidades de mililitros aquí mostradas:
Hay que realizar las combinaciones de las cantidades de mililitros pertinentes de cloruro de bario y ácido sulfúrico en los tubos contemplados
en esta tabla.
MATERIAL Y REACTIVOS
-Tubos de ensayo con tapón
-Pipetas de diferentes
volúmenes
-Espectrofotómetro con sus
cubetas
-Agua destilada estéril
-H2SO4
0,36M
-BACl2 0,048M
PROCEDIMIENTO
- Encedemos el
espectrofotómetro.
- Pulsamos GO TO WL.
- Ponemos la
absorbancia en 550 nm damos a enter.
- Medimos la
absorbancia de los diferentes tubos.
- Ponemos la celda
en Blanco (B).
-Para el tubo 0
cogemos agua estéril para hacer autocero en el espectrofotómetro.
-Cogemos tubos de menos concentrados a más concentrados recogemos con pipeta pasteur y hechamos al cubeta. La cubeta se coge por la parte rallada.
-Se mete en el espectrofotómetro y apuntamos absorbancia.
-La absorbancia de
la muestra del espectrofotómetro es: A= 0,400 Este dato se sustituye en la
ecuación en la variable Y obteniendo el número de UFC/ml.
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